都正干貨 | 解決生物基質(zhì)中酯類前體藥物不穩(wěn)定的常見措施
發(fā)布時(shí)間：
2019-10-24
來源：
前體藥物，在給藥后會轉(zhuǎn)化成具有藥理活性的目標(biāo)藥物。大多數(shù)前體藥物含酯類結(jié)構(gòu)，通過衍生化其結(jié)構(gòu)中的羧基或羥基而生成，所以在轉(zhuǎn)化成目標(biāo)藥物的過程會受到體內(nèi)多種酯酶的催化。同樣，它們在體外也會發(fā)生水解反應(yīng)，如樣品采集、前處理、儲存和解凍等過程，因此在對生物樣品分析前，應(yīng)避免前體藥物在體外發(fā)生分解，常見的預(yù)防措施有以下幾點(diǎn)供參考：
01
溫度控制
溫度控制對生物樣品中不穩(wěn)定分析物的分析可靠性起著關(guān)鍵作用。通常是將樣品處理在冰水?。?~4℃）中，分析物在生物基質(zhì)中的酶催化降解速率要比室溫（22℃）下慢的多。待分析基質(zhì)是血漿時(shí)，一般將全血4℃低溫離心得到血漿，然后將血漿樣品立刻冷凍，盡可能縮短樣品采集到冰箱冷凍的有效間隔。
02
抗凝劑選擇
不同抗凝劑可能會影響到化合物的穩(wěn)定性。常見的抗凝劑有肝素和EDTA，兩者作用機(jī)制不同，肝素能加速凝血酶失活。而EDTA鰲合鈣離子，阻斷凝血鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，并能夠抑制磷脂酶和酯水解酶的活性。因此，常用EDTA作為酯類前體藥物血漿中的抗凝劑。
03
PH控制
大多數(shù)酶反應(yīng)都有一個(gè)窄的工作PH窗口，常用的PH調(diào)節(jié)劑有不同濃度的甲酸、乙酸、磷酸等。在使用過程中應(yīng)調(diào)整加入PH調(diào)節(jié)劑的強(qiáng)度和種類，以降低試驗(yàn)樣品的黏度。
04
酶抑制劑
酶抑制劑可以用來穩(wěn)定生物樣品中前體藥物和酶不穩(wěn)定化合物。用酶具有專屬性和選擇性，所以選擇和使用合適的脂酶抑制劑非常重要。實(shí)際使用過程中，將一個(gè)或多個(gè)候選酯酶抑制劑配制在目標(biāo)生物基質(zhì)中，利用不同濃度評價(jià)其對基質(zhì)中前體藥物穩(wěn)定性的影響。常見酯酶抑制劑有砷酸鉀、哌唑嗪、乙酰膽堿、毒扁豆堿等。